Пируваткиназа М2
копрологический тест на Tu M2-PK (набор для ИФА)
Высокочувствительный тест для иммуноферментного анализа, который позволяет проводить количественное определение онкомаркера Tumor M2-PK (опухолевая пируваткиназа М2-типа) в кале (для диагностики гастроинтестинальных опухолей). Моноклональные антитела, нанесенные на поверхность лунок планшета, специфически реагируют с опухолевой пируваткиназой М2 (Tumor M2-PK) и не вступают в перекрестные взаимодействия с другими изоформами фермента (типы L, R, M1 и M2).
Основные принципы метода:
Присутствующая в образце кала пациента Tumor M2-PK и стандарт Tumor M2-PK из набора для ИФА связываются с первыми моноклональными антителами, специфичными только к Tumor M2-PK и, таким образом, иммобилизуются на планшете. Моноклональные антитела второго типа (конъюгированные с биотином) связываются с Tumor M2-PK в течение следующей инкубации. Затем добавляют конъюгат пероксидазы хрена со стрептавидином (ПХ - СА), который связывается с биотином антител второго типа. Пероксидаза хрена окисляет субстрат - ТМВ [3, 3' 5, 5' -тетра-метил бензидин], который приобретает желтый цвет. В заключении концентрацию окисленного ТМВ определяют фотометрически.
Состав набора:
1. 12 стрипов для ИФА с 8 лунками каждый, покрытыми моноклональными антителами к Tumor M2-PK (96 лунок).
2. 5-кратный концентрат (5х) буфера для образца/промывки, 100 мл.
3. 5-кратный концентрат (5х) буфера для экстракции образца кала, 100 мл.
4. Стандарты Tumor M2-PK от 1 до 4, готовые к применению, каждый содержит объем 700 мкл.
5. Контрольный образец, готовый к применению, 700 мкл.
6. Вторые моноклональные антитела к Tumor M2-PK, конъюгированные биотином (анти-TumorM2-PK-био), 150 мкл.
7. Конъюгат пероксидазы хрена со стрептавидином: POD-стрептавидин, готовый к применению, чувствительный к свету, 8 мл.
8. Раствор субстрата, готовый к применению, чувствительный к свету, 12 мл.
9. Раствор для остановки реакции (стоп-раствор), готовый к применению, 12 мл.
10. Пластиковый пакет, содержащий испаритель для хранения неиспользованных стрипов.
Необходимые дополнительные приспособления:
• Спектрофотометр для плашек ИФА, способный считывать показания на длине волны 405 нм (референсная длина волны 620 нм)
• Полистиреновые пробирки (3 и 10 мл)
• Мерный цилиндр 500 мл
• Вихревой встряхиватель типа вортекс (Vortex)
• Автоматическая 8-канальная пипетка с переменным объемом 50-250 мкл
• Пипетки на 2, 5 и 10 мл